萬曆皇帝朱翊鈞做太子時的隨侍宦官。
- 事蹟：與馮保分屬不同“派系”，乘內外對馮保的忌恨，以及朱翊鈞對馮保的不滿，偷偷為朱翊鈞謀劃計策，成功將馮保扳倒。
- 結局：後因權勢漸大，引起一些官員不滿，最終被萬曆皇帝疏遠。
陳矩
- 經歷：萬曆年間任司禮監典簿，後升任司禮監秉筆太監，掌管東廠。
- 事蹟：為人正直，在任期間，處理事務較為公正，曾經手處理馮保相關事體，在當時的宦官中以廉潔和謹慎著稱。
- 結局：在萬曆朝一直受到皇帝的信任，得以善終。
田義
- 經歷：歷經嘉靖、隆慶、萬曆三朝，萬曆年間為司禮監太監。
- 事蹟：性格剛直，曾力勸萬曆皇帝取消礦稅，不畏權貴，敢於直言。他還參與了一些重要的宮廷事務和政治活動。
- 結局：一直受到皇帝的信任和重用，死後被葬於北京石景山區模式口。
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萬曆朝後宮主要人員包括皇后、妃嬪等：
皇后
- 孝端顯皇后王喜姐：萬曆六年被冊立為皇后，是歷史上在位時間最長的皇后之一，長達42年。她生性賢德，多次保護被立為太子的朱常洛，還拿出自己的用度賑濟災民或用作軍餉，被稱為“女中堯舜”。
- 孝靖皇后王氏：即王恭妃，原為宮女，被萬曆帝看中並臨幸後生下皇長子朱常洛。她長期遭受冷落，在萬曆三十九年去世，最初諡“溫肅端靜純懿皇貴妃”，後被追封為皇太后。
妃嬪
- 鄭貴妃：萬曆十年入宮，因美貌和活潑的性格深得萬曆帝寵愛，四年內便從淑嬪晉封為皇貴妃。她為萬曆帝生下三位公主和三位皇子，其中壽寧公主朱軒媁是她唯一長大成人的公主，萬曆帝對其寵愛有加。
- 李敬妃：受寵程度僅次於鄭貴妃，居住在鹹福宮，為萬曆帝生有皇六子朱常潤和皇七子朱常瀛，在生下幼子後於萬曆二十五年去世，被追封為恭順榮莊端靖皇貴妃。
- 劉昭妃：萬曆六年被選入宮封為昭妃，她性格謹厚，不與其他妃嬪爭寵，歷經六朝皇帝，明熹宗即位後被尊為宣懿太妃，掌管皇太后印璽。
- 楊宜妃：與劉昭妃一同被選入宮，但關於她的記載相對較少。
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以下是萬曆朝民間較為有名的人物：
遊俠
- 呂光午：武藝高強，奉其師何心隱之命行走江湖“求天下奇士”，被世人稱作“浙之大俠”。
- 汪文言：“布衣任俠，有智術”，在東林黨中活動，遭錦衣衛拷打至死，終不肯牽陷他人。
醫學
- 萬密齋：原名萬全，號密齋，是嘉靖至萬曆年間與李時珍齊名的著名醫學家。他治學嚴謹，醫德高尚，行醫五十多年，以兒科、婦科、痘診科享有盛譽，提出“三有餘、四不足”之說，著有《萬密齋醫學全書》。
- 李時珍：字東壁，號瀕湖，著名的醫學家和藥學家。他遊歷全國各地，收集大量藥材和病歷，著成《本草綱目》，詳細地描述了眾多藥材和病症，對中醫發展影響深遠。
- 龔廷賢：出身醫學世家，其父龔信曾任太醫院醫官。他學醫刻苦，足跡遍及多地，蒐集民間秘方、驗方。1593年因治癒魯王妃，被贊為“天下醫之魁首”，萬曆皇帝特賜雙龍“醫林狀元”匾額。