1964年8月5日中共中央書記處決定：中央成立“四清”、“五反”指揮部，由劉少奇掛帥，並主持修改《後十條》。1964年8月11日至20日王光美在廣州整理修改《關於一個大隊的社會主義教育運動的經驗總結》。8月19日，劉少奇就批轉王光美報告一事致信毛澤東並中共中央。9月1日，經中共中央和毛澤東同意，這個報告作為中共中央檔案下發。1964年11月王光美到河北省保定地區新城縣高鎮大隊參加“四清”工作隊，化名魯潔。1964年12月15日至1965年1月14日中共中央政治局召開全國工作會議。會議後期在毛澤東主持下制定《農村社會主義教育運動中目前提出的一些問題》，簡稱《二十三條》。
1965年1月劉少奇在第三屆全國人民代表大會第一次會議上，再次當選為中華人民共和國主席，並擔任國防委員會主席。1965年底至1966年春王光美到河北省定興縣縣直屬機關和周家莊參加“四清”工作隊。1966年3月26日至4月19日中華人民共和國主席劉少奇和夫人王光美，訪問巴基斯坦、阿富汗、緬甸。1966年4月20日劉少奇赴杭州出席毛澤東主持的中共中央政治局常委擴大會議，24日回到北京。王光美隨行。1966年5月16日中共中央政治局擴大會議透過毛澤東主持制定的旨在發動“文化大革命”的《中國共產黨中央委員會通知》，即《五一六通知》。5月28日，以陳伯達為組長、康生為顧問、江青等為副組長的中央文化革命小組正式成立。1966年6月3日劉少奇主持中共中央政治局常委擴大會議決定，向北京市的一些大學、中學派出工作組。1966年6月19日根據劉少奇指示，王光美參加駐清華大學工作組。1966年7月下旬毛澤東從外地回到北京，對工作組問題提出嚴厲批評，並決定撤銷工作組。1966年8月1日至12日中共八屆十一中全會在北京召開。8月5日，毛澤東寫了主要針對劉少奇的《炮打司令部——我的一張大字報》。8月12日，全會根據毛澤東的提議重新選舉中央政治局常委，劉少奇從第二位下降到第八位。1966年12月18日“王光美專案組”成立，謝富治任組長，陳伯達任顧問。1967年3月以後，這個專案組在江青、康生、謝富治等人的直接控制和指揮下，成為“劉少奇、王光美專案組”。1967年4月10日清華大學造反派組織30萬人大會批鬥王光美，並在會前和會後三次審訊王光美。王光美據理力爭。1967年7月18日劉少奇、王光美被隔離看押，失去行動自由。在此前後，劉少奇、王光美透過各種方式申辯、抗爭，均無結果。1967年9月13日王光美被正式逮捕，11月轉押秦城監獄。1968年10月在極不正常的情況下，中共八屆十二中全會批准在江青、康生、謝富治等人主持下用偽證寫成的《關於叛徒、內奸、工賊劉少奇罪行的審查報告》，造成黨的歷史上最大的一樁冤案。1969年11月12日劉少奇在河南開封逝世。1978年12月18日至22日中共十一屆三中全會在北京舉行。全會開始全面、認真地糾正“文化大革命”的錯誤。
1978年12月22日根據中共中央組織部的決定，王光美被釋放出獄，隨後徹底平反。
1979年2月中共中央決定由中央紀律檢查委員會和中央組織部對劉少奇一案進行復查。
1979年6月王光美出席中國人民政治協商會議五屆二次會議，並在會上增補為全國政協委員。
1979年11月王光美任中國社會科學院外事局局長。
1980年1月25日王光美應邀在中共中央紀律檢查委員會第二次全會期間，向出席全會的第一、二組全體同志和其他各組部分同志，談劉少奇在“文化大革命”中被迫害的情況。
1980年2月29日中共十一屆五中全會作出《關於為劉少奇同志平反的決議》。
1980年5月13日至14日在全國政協副主席王首道、劉瀾濤等陪同下，王光美率子女前往河南省鄭州、開封，迎取劉少奇的骨灰。
1980年5月17日中共中央在人民大會堂隆重舉行劉少奇追悼大會。黨和國家領導人以及首都各界群眾代表出席。鄧小平致悼詞。1980年5月19日遵照劉少奇生前的遺言，王光美等將劉少奇的骨灰撒在大海里。
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王光美年表（3）
1981年10月25日王光美致信中共中央組織部，表示將劉少奇平反後補發的工資和